上海富衡 | 细胞培养常用的生长因子浓度比例

1、表皮生长因子（EGF）

功能：促进上皮细胞、干细胞增殖，抑制分化。

浓度：

示例：在肺癌细胞 A549 培养中，10 ng/mL EGF 可增强贴壁生长。

2、成纤维细胞生长因子（FGF 家族）

碱性 FGF（bFGF/FGF2）：

功能：促细胞增殖、血管生成、神经保护。

浓度：

酸性 FGF（aFGF/FGF1）：

浓度：5–50 ng/mL（较少用，多用于成纤维细胞或内皮细胞培养）。

3、血小板源性生长因子（PDGF）

功能：刺激间充质细胞（如成纤维细胞、平滑肌细胞）增殖、迁移。

浓度：

4、胰岛素样生长因子（IGF-1/IGF-2）

功能：模拟胰岛素作用，促细胞代谢、增殖，抑制凋亡。

浓度：

5、神经生长因子（NGF）

功能：促进神经元存活、分化，维持交感 / 感觉神经功能。

浓度：

6、血管内皮生长因子（VEGF）

功能：促进内皮细胞增殖、血管生成。

浓度：

7、转化生长因子 -β（TGF-β）

功能：双向调节（低浓度促增殖，高浓度诱导分化 / 抑制）。

浓度：

• 细胞特异性：

  癌细胞可能对生长因子更敏感（如乳腺癌细胞 MDA-MB-231 需低浓度 EGF，5–10 ng/mL），而原代细胞常需更高浓度（如原代角质形成细胞需 50 ng/mL EGF）。

• 组合使用：

  干细胞培养常需多种因子协同（如 hPSC 培养：bFGF 40 ng/mL + EGF 20 ng/mL + Noggin 100 ng/mL）。

• 产品活性差异：

  不同厂家生长因子比活性不同（如 PeproTech vs. R&D Systems），需按说明书调整，首次使用建议设置浓度梯度（如 1、5、10、50、100 ng/mL）。

• 溶剂与储存：

  多数生长因子需溶于含载体蛋白（如 0.1% BSA）的 PBS，分装冻存于 - 20℃，避免反复冻融导致活性下降。

人胚胎干细胞（hESC）：

配方：bFGF 40 ng/mL + TGF-β 5 ng/mL + 基础培养基（mTeSR1 或 Essential 8）。

神经干细胞（NSC）：

增殖培养基：bFGF 20 ng/mL + EGF 20 ng/mL（无血清培养，维持悬浮神经球）。

肿瘤细胞侵袭模型：

Transwell 实验：上室细胞无因子，下室培养基含 PDGF 50 ng/mL + VEGF 100 ng/mL（诱导细胞迁移）。

生长因子浓度无统一标准，需通过预实验（如 CCK-8 细胞增殖实验、细胞形态观察）确定最适浓度。核心原则：从低浓度开始（避免高浓度抑制），结合细胞类型、实验目的及文献报道逐步优化。