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经费告急!哪些耗材可以重复利用 | 上海富衡

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当实验室出现经费较为紧缺或暂时没有耗材使用时,部分耗材经严格清洗、灭菌后也可重复使用作为暂时代替的应急手段,其主要适用于对成本敏感、非严格无菌要求或特定实验场景(如原代细胞粗分离、初步培养),对于精度要求高的实验,建议暂时搁置,避免数据上误差和细胞、试剂的污染。



玻璃制品(最常用)




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该图来源网络

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玻璃培养瓶/培养皿


适用场景:常规细胞传代、非原代细胞培养(如永生细胞系)。

处理步骤:

  1. 去残渣:使用后立即倒弃培养基,用清水冲洗残留细胞(避免干燥后难以清除)。

  2. 浸泡与刷洗:浸泡于中性洗涤剂(如专用玻璃清洗剂)或稀盐酸(0.1M,去除蛋白残留)中2-4小时,用软毛刷轻柔刷洗内壁,避免刮伤表面。

  3. 彻底冲洗:用自来水冲洗5-10次,再用蒸馏水/去离子水冲洗3次,倒置沥干。

  4. 灭菌:高压蒸汽灭菌(121℃,20分钟)或干热灭菌(160℃,2小时),灭菌后干燥保存。

注意:

玻璃表面若有划痕或破损,易残留细胞或污染物,需淘汰。 - 原代细胞、干细胞等敏感细胞培养时,建议使用一次性TC处理耗材(玻璃表面亲水性低于塑料,可能影响贴壁)。


2
玻璃吸管(移液管)


优势:耐高温、化学稳定性强,适合反复灭菌。

处理要点:

  • 使用后立即浸泡于清水中(避免液体干涸堵塞管口),用含洗涤剂的软毛刷清洗内壁,必要时用超声清洗机辅助去垢。

  • 灭菌前需烘干或沥干,可采用牛皮纸包裹后高压灭菌,或放入金属筒中干热灭菌。


金属器械




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该图来源网络


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解剖器械(镊子、剪刀、手术刀)


适用场景:组织块处理(如原代细胞分离)、胚胎操作等。

处理步骤:

1、初步清洁:用75%酒精擦拭表面,去除组织碎屑。

2、深度灭菌:

  • 高压蒸汽灭菌(适合耐湿热器械,如不锈钢制品)。

  • 干热灭菌(180℃,1小时,适合精密器械)或灼烧灭菌(火焰快速灼烧,仅用于局部处理,需注意避免器械变形)。

注意:

  • 避免使用生锈或镀层脱落的器械,防止金属离子污染细胞。

  • 精密器械(如显微镊)建议单独包装灭菌,避免碰撞损伤。



02
金属细胞筛网(细胞过滤器)


用途:组织消化后过筛制备单细胞悬液。

处理方法:

  1. 用PBS冲洗残留组织,浸泡于0.1% SDS溶液中30分钟,清水冲洗后超声处理(去除蛋白残留)。

  2. 高压灭菌后晾干,存放于干燥盒中。


塑料耗材(有限重复使用)




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高质量聚丙烯(PP)或聚苯乙烯(PS)耗材


可重复的类型:

  • 离心管(50mL/15mL,无TC处理的普通型):用于细胞离心、试剂分装,非贴壁操作。

  • 试剂槽、移液槽:用于配置培养基或缓冲液,需确保无细胞黏附残留。 禁止重复使用:TC处理的贴壁培养板/瓶(表面涂层易磨损,影响细胞黏附)、低吸附耗材(涂层破坏后失去防黏功能)。

塑料耗材重复灭菌次数有限(通常3次以内),高温高压后易变形、老化,释放化学物质(如增塑剂),可能干扰细胞状态。


02
硅胶制品(如细胞刮)


处理:用后立即清洗表面细胞残渣,75%酒精浸泡30分钟,或高压灭菌(注意硅胶耐温上限,避免过度高温)。

适用:仅用于非敏感细胞的传代(如HeLa细胞),避免用于原代细胞或基因编辑细胞。


其他可重复耗材




1、不锈钢细胞培养支架/载玻片

用途:特殊培养体系(如气液界面培养、共培养支架)。

处理:盐酸浸泡去除金属氧化层,清水冲洗后高压灭菌,干燥保存。

2、玻璃注射器(带金属针头)

适用:细胞注射、微滴操作等,需确保针头无堵塞,玻璃活塞润滑良好。

灭菌:拆卸后分别清洗,高压灭菌或干热灭菌。


不可重复使用的耗材(必须一次性)




类型原因
TC 处理培养板 / 瓶表面亲水性涂层易被洗涤剂破坏,重复使用导致细胞贴壁异常。

移液器吸头(普通 / 滤芯)

塑料材质易残留核酸、蛋白或化学试剂,且灭菌后可能变形,影响移液精度。
细胞培养皿(带透气膜)透气膜结构复杂,清洗后无法保证无菌性和透气性。
冻存管

内壁可能有防黏涂层,且冻存过程中可能残留细胞保护剂(如 DMSO),难以彻底清除。



重复使用的核心原则





1
风险控制


避免用于关键实验:原代细胞培养、基因编辑细胞、干细胞分化等对污染高度敏感的场景,必须使用一次性耗材。

标记重复次数:在耗材上标注“已使用X次”,塑料耗材建议3次以内,玻璃制品5次以内(视磨损情况)。


2
清洗灭菌标准


无残留检测:清洗后用蛋白检测试剂(如BCA法)验证表面无蛋白残留,或通过空白培养(接种培养基后孵育24小时,观察是否浑浊)排查污染。

灭菌记录:建立耗材灭菌台账,记录每次灭菌时间、条件和使用人。


3
成本与效率平衡


重复使用可降低成本(尤其大规模培养),但需投入额外的清洗、灭菌时间和人力,需评估综合效益。



可重复使用的耗材以玻璃制品和金属器械为主,塑料耗材仅在非贴壁、低敏感场景有限重复。以上重复耗材或多或少会对细胞、实验产生一些误差或者污染,仅为经费非常紧缺的实验室或短期内无法提供相应耗材的应急手段,对于科研精度要求高的实验,优先使用一次性耗材以避免污染风险和数据偏差。






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