SH - SY5Y 细胞是SK-N-SH细胞系经3次克隆后的亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)，母株SK-N-SH细胞是1970年来源于4岁女性患者骨瘤转移灶的神经母细胞瘤，其在神经科学研究领域应用广泛，常被用于神经退行性疾病、神经发育以及药物研发等方面的研究。

SH-SY5Y细胞贴壁能力较弱，贴壁细胞呈上皮样，有短触角延伸出来，倾向于成簇生长，容易成团。富衡生物提供的SH-SY5Y细胞采用以下培养体系：

细胞名称	人神经母细胞瘤细胞；SH-SY5Y
细胞别称	SH-Sy5y; SHSY5Y; SHSY-5Y; SK-SH-SY5Y; SY5Y; SH-SY5Y Parental
产品货号	FH0156
产品规格	1×10^6cells/T25培养瓶
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
培养体系	DMEM高糖培养基＋10% FBS＋1% P/S
传代比例	1:2~1:3
消化时间	0.5-1min
冻存条件	无血清细胞冻存液（科研级）
培养环境	气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃。

针对SH-SY5Y细胞培养只需要牢记三个要点：“慢稳”“轻传”“舍聚团”。

这里说的“慢稳”指的是：给细胞时间慢慢恢复，稳定状态，主要针对细胞到货以及细胞复苏。常温运输过程中，细胞不免受到震荡和温度变化的影响，出现皱缩、聚团甚至脱落的现象。尤其是贴壁能力较弱的SH-SY5Y细胞，常温细胞收货后，把细胞放进细胞培养箱静置过夜以恢复状态，在稳定环境下，瓶中脱落的细胞有可能会再次贴壁；次日，观察到细胞形态舒展即可进行常规传代操作。

若细胞大片脱落且过夜无法贴壁，则通过离心将漂浮的细胞团收集起来，在离心管里进行胰酶消化后重新铺板即可。贴壁细胞常规方法消化下来，和处理好的脱落细胞合并，混匀后铺板。

SH-SY5Y细胞脱落处理步骤：

复苏SH-SY5Y细胞在遵循“快复”的同时也需要注意“慢稳”

SH-SY5Y细胞复苏步骤：

1. 冻存细胞在37℃水浴中迅速摇晃解冻；

2. 将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的离心管中，1000rpm 离心 5min

3. 弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀，接种于T25培养瓶中（或6cm皿中），培养过夜，次日显微镜下观察状态，48h后再换液或者进行传代操作；

SH-SY5Y细胞复苏
复苏24H
复苏48H

图：富衡生物复苏SH-SY5Y细胞状态（仅供参考）

（补充说明：针对SH-SY5Y细胞，换液传代操作均间隔48h，由于复苏需要间隔48h换液，不建议使用含血清的冻存体系冻存细胞，在此冻存的细胞是使用本公司生产无血清快速冻存液）

SH-SY5Y细胞容易受外界刺激，所以在进行传代时，必须轻轻吹打，哪怕是遇到有严重聚团现象的SH-SY5Y细胞也尽量不要剧烈吹打，减少对细胞的物理刺激。由于SH-SY5Y细胞倾向成簇生长，正常消化下来时，多个细胞相连是正常现象（如下图），只要给细胞充足空间生长，细胞会舒展开来。为了传代时减少对细胞的刺激，建议在细胞密度为80-90%时1:2传代，用5ml移液管吹打细胞。

随着传代次数增加，可能会由于传代不当出现细胞大量聚团，甚至无舒张形态细胞的情况，应该舍弃聚团的细胞。

SH-SY5Y细胞聚团处理步骤：

（补充说明：因剧烈吹打受损的SH-SY5Y细胞要恢复大约需要一周到两周的时间，建议期间不要用PBS刺激细胞，直接换液操作即可）

牢记三个要点“慢稳”“轻传”“舍聚团”。