上海富衡 | 实验室内断电，如何最大限度将试剂和细胞保存下来

实验室内断电后，需根据样本类型（细胞/试剂）的低温敏感性、是否有备用设备及断电持续时间，分优先级采取 “保温-转移- 应急处理” 措施，核心是延缓低温样本升温、避免常温样本变质。

快速评估与基础防护(30分钟内)

断电后首要任务是 “减少热量入侵”，为后续处理争取时间，需立即完成以下操作：

1、关闭所有设备门，禁止反复开关

低温设备（-80℃冰箱、液氮罐、4℃冰箱、超低温冰柜）：门体密封是保温关键，每开关1次，-80℃冰箱温度上升5-10℃，4℃冰箱温度上升2-3℃，仅在“转移关键样本” 时快速开门 1 次（单次≤30秒）。
常温设备（培养箱、离心机）：若培养箱内有正在培养的细胞（如37℃贴壁细胞），先关闭箱门，利用箱体保温维持温度（无加热时，37℃培养箱温度降至室温约需2-4小时）。

2、切断非必要设备电源

如移液器、涡旋仪、电脑等，避免来电时电压波动损坏设备，同时优先保障备用电源（若有）供给关键低温设备（如液氮罐自动补液装置）。

3、记录关键信息

写下断电时间、各设备内样本类型（如-80℃冰箱：细胞株、PCR酶；4℃冰箱：抗体、培养基），便于后续判断样本状态。

分 “低温样本” 优先级保护

低温样本（-80℃/-196℃储存）对温度波动最敏感，细胞＞酶类/抗体＞核酸/缓冲液，需按“珍贵性+敏感性”排序处理：

1. 超低温储存样本（-80℃冰箱 / 液氮罐）：核心是 “维持极低温”

（1）若有备用低温设备（优先选择）

液氮罐优先转移珍贵细胞
若实验室有备用液氮罐或可联系附近实验室借用，优先转移-80℃冰箱内的冻存细胞（尤其是稀缺株、传代少的细胞）和液氮罐内的悬浮细胞/胚胎：
1、用预冷的冻存盒+密封袋（提前放入-80℃预冷）装取冻存管，转移时避免冻存管直接接触空气（防止结霜融化），放入备用液氮罐后确保完全浸没在液氮中（液面需覆盖冻存管）。
2、若用干冰转移：干冰需包裹在保温箱内（避免升华过快），冻存管与干冰之间用纸巾隔开（防止温度过低导致管体破裂），干冰量需满足“转移途中每小时消耗100g”（如转移1小时需准备200g干冰，留有余量）。
备用-80℃冰箱转移敏感试剂
酶类（如Taq酶、逆转录酶）、单克隆抗体、病毒液等，若有备用-80℃冰箱，断电后1-2小时内（此时原冰箱温度通常仍在-40℃以下）快速转移，放入冰箱最底层（冷空气密度大，底层温度比上层低5-8℃）。

（2）无备用设备：强化原位保温，延长低温时间

· -80℃冰箱：外部保温 + 内部补冷

外部：用厚棉被、泡沫板或保温毯包裹冰箱侧壁、顶部和门缝（重点密封门缝，避免漏冷），可延缓温度上升速度 30%-50%；
内部：若实验室有储备干冰，用绝缘容器（如泡沫盒）装干冰（500-1000g），缓慢放入冰箱角落（避免直接接触样本，防止冻存管破裂），可将 - 40℃以下低温状态延长 4-6 小时；若有瓶装液氮（少量），同样用绝缘容器装后放入，效果优于干冰（但需注意液氮挥发产生的压力，不可密封容器）。
样本位置：将细胞冻存盒、敏感试剂移至冰箱最内侧 + 最底层，远离门体和侧壁（门体附近温度上升最快）。

·液氮罐：减少开盖 + 监测液位

手动液氮罐断电后（无自动补液），只要不频繁开盖，液氮挥发速度极慢（满罐液氮可维持 3-7 天），需每天观察液位计（若有），若液位低于冻存管高度，及时补充液氮（联系供应商或转移样本）。

（3）超低温样本保存极限（无备用设备）

关键提醒：若-80℃冰箱内温度升至-20℃以上（可通过外部温度计或触摸样本判断：冻存管变软、有融化痕迹），细胞需立即复苏（不可再冻存），酶类/抗体解冻后需转移至4℃冰箱（短期1-2天）并检测活性，核酸解冻后4℃可保存1周（RNA需加RNase抑制剂）。

2、4℃冰箱储存样本：避免升温变质，短期可室温过渡

4℃冰箱内样本（如液体培养基、抗体、缓冲液、细菌培养物）对温度敏感性低于超低温样本，处理核心是 “延缓升温至室温”：

优先转移：易变质样本
细菌 / 酵母液体培养物（室温下易过度繁殖）、酶标抗体（室温易失活）、解冻后的血清（室温易析出沉淀），若有备用4℃冰箱（如实验室小型冷藏柜），立即转移；若无，可放入装满冰袋的保温箱（冰袋提前冷冻，样本用密封袋包裹，避免受潮），4℃状态可维持6-12小时。
次优先：稳定样本
未开封的培养基、PBS缓冲液、固定液（如4%多聚甲醛），室温下可短期放置（25℃室温下可维持8-12小时不变质），无需紧急转移，但若断电超过12小时，需检测pH值（培养基）或澄清度（缓冲液），无异常可继续使用。
禁止操作：避免反复冻融
4℃保存的样本若已完全升温至室温（手感与室温一致），不可再放回4℃冰箱（除非说明书允许），需尽快使用（如培养基24小时内用完，抗体48小时内用完）。

3、37℃培养箱内细胞：维持恒温，短期保温+应急处理

培养箱内的活细胞（如贴壁细胞、悬浮细胞）依赖37℃+5%CO₂环境，断电后需分情况处理：

断电1-2小时内：关闭培养箱门，利用箱体保温（培养箱内温度从37℃降至30℃约需2-3小时），无需操作，来电后立即开启加热和CO₂，待温度稳定后观察细胞形态（若贴壁细胞未脱落，可正常培养）。
断电2-4小时：若温度降至25℃以下，需用保温毯包裹培养箱（或在培养箱内放入预热至37℃的温水袋，用隔板与细胞培养皿隔开，避免污染），延缓温度下降。
断电超过4小时：贴壁细胞可能脱落、悬浮细胞可能聚团，来电后观察细胞存活率（用台盼蓝染色），若存活率低于50%，需重新复苏细胞；若有备用培养箱（如附近实验室），断电后2小时内转移细胞（用密封袋包裹培养皿，避免污染）。

断电恢复后的 “关键检查”

来电后不要立即操作所有设备，需按 “优先级” 检查，确保样本安全：

1、超低温设备（-80℃冰箱/液氮罐）

等待-80℃冰箱温度降至-60℃以下（通常需4-6小时，通过外部显示屏观察），再快速开门检查样本：
1、冻存细胞：若冻存管完全结冰（无融化痕迹），可继续保存；若部分融化（管壁有水珠），立即复苏，复苏后用台盼蓝检测存活率（存活率＞70%可传代，＜50%需丢弃）。
2、试剂：酶类 / 抗体若未完全解冻，可继续保存；若已解冻，需做活性验证（如 PCR 酶检测扩增效率，抗体检测 Western blot 条带）。
液氮罐：检查液位，补充液氮至正常高度，确保所有冻存管完全浸没。

2、4℃冰箱

来电后 1 小时（温度降至 4℃）检查样本：