上海富衡 | 知己知彼，百战不殆！一文了解细胞培养过程中可能遇到的细胞污染！

· 特征

1、培养基可能在4-6小时内呈现混浊。

2、稍加震荡，便会有很多混浊物漂起。

3、显微镜下呈黑色细沙状，或背景有大量黑点。

· 处理方法

1、轻度细菌污染：可用10X双抗清洗处理。

2、重度细菌污染：建议消杀后丢弃。

· 特征

1、最短3天才能长出椭圆形的霉斑。

2、霉斑漂浮在培养液表面，随时间逐步扩大。

3、显微镜下可观察到菌丝体。

· 处理方法

真菌污染较难根除，且真菌孢子易飘散，污染实验室，不建议保留，建议消杀后丢弃。

· 特征

1、霉菌污染通常表现为培养液中出现白色、灰色或黑色的菌落。

2、菌落可能漂浮在培养液表面，也可能附着在细胞培养瓶的壁上。

· 处理方法

1、立即丢弃受污染的细胞和培养基。

2、使用温和的洗涤剂（如10%的84消毒液）彻底清洗培养设备和实验台。

3、使用紫外线灯或臭氧发生器对实验室进行消毒处理。

· 特征

1、支原体是最小的微生物，直径仅50-300nm，无法通过光学显微镜看见，但可通过电镜观察到。

2、增殖减慢，上清液清澈，背景干净，细胞形态异常（拉丝、铺展）。

· 处理方法

1、若细胞污染后状态尚可，添加支原体抑制剂培养2-3代可转阴。

2、若细胞污染后状态很差，建议消杀后丢弃。

· 特征

1、黑胶虫污染后培养液颜色不变化，也不浑浊。

2、显微镜下观察细胞间隙存在布朗运动的黑色异物。

3、黑色异物可能是点状或杆状的等。

4、与细胞生长呈现出“此起彼伏”的状态。

5、换液清洗无效。

· 处理方法

由于黑胶虫污染的特征和处理方法未在参考文章中明确提及，通常需要根据具体情况采取适当的处理措施，如更换培养基、清洗培养设备等。

· 特征

1、交叉污染指2种或2种以上的细胞相互污染，无法分离培养。

2、显微镜下发现细胞生长异常、形态变化，或细胞实验实验中发现细胞功能改变。

3、通常需要进行STR鉴定才能确定。

· 处理方法

1、一旦发现交叉污染，应立即停止使用该细胞系，并追溯可能的污染源。

2、对于已经污染的细胞系，应全部丢弃，并重新从原始来源或可靠的细胞库获取。

3、加强实验室的细胞管理，确保不同细胞系之间有明确的标识和隔离措施。

· 特征

1、病毒污染可能导致细胞生长缓慢、形态异常或细胞死亡。

2、病毒污染通常难以通过肉眼或显微镜直接观察到，但可以通过细胞病变效应（CPE）或特定的检测方法（如PCR）来检测。

· 处理方法

1、立即停止使用受污染的细胞系，并丢弃所有受污染的培养基和细胞。

2、使用温和的洗涤剂彻底清洗培养设备和实验台。

3、如果实验室中存在其他细胞系，应将其隔离并检测是否受到病毒污染。

4、如果病毒污染严重或涉及高危病毒，应立即通知相关机构和部门进行处理。