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上海富衡 | 传代后细胞不长! 怎么办?

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传代后细胞不长可能涉及多个方面的原因,这些原因复杂且相互关联。
以下是对这一现象的原因分析和相应的处理方法,希望能够帮助我们的客户解决这一问题。



原因分析


01
细胞适应性问题

更换培养液或血清:当细胞从一个培养环境转移到另一个新的培养环境时,它们可能需要时间来适应新的培养基或血清的成分。这种适应期可能导致细胞生长暂时停滞。

02
培养条件不当
  1. 温度、CO2浓度和pH值:细胞培养箱的温度、CO2浓度和pH值等条件必须严格控制在适宜范围内,任何微小的偏差都可能影响细胞的生长。

  2. 渗透压和营养成分:培养液的渗透压和营养成分也是影响细胞生长的重要因素。如果培养液中的营养成分不足或渗透不适宜,细胞将无法正常生长。

03
污染问题
  1. 细菌、真菌污染:培养物中的细菌或真菌污染会严重影响细胞的生长。这些微生物会与细胞竞争营养资源,甚至直接杀死细胞。

  2. 支原体污染:支原体污染是细胞培养中常见但难以察觉的问题。由于体积微小,在一般光学显微镜下无法分辨,所以它们可能在培养物中持续存在并影响细胞的生长。

04

操作问题

  1. 胰酶消化时间:胰酶消化时间过长或过短都可能导致细胞损伤或未完全分离,从而影响细胞的生长。

  2. 接种密度:接种密度过低可能导致细胞生长缓慢,而接种密度过高则可能导致细胞间的竞争和营养资源的不足。

05
细胞状态问题

细胞老化:随着传代次数的增加,细胞可能会逐渐老化,失去增殖能力。

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02

SMALL RED FLOWER
处理方法



01
验证和调整培养条件
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  1. 比较新培养液与原培养液的成分,确保新培养液适合细胞生长。

  2. 逐步让细胞适应新培养液,可以通过逐渐增加新培养液的比例来实现。

  3. 定期检查并调整培养箱的温度、CO2浓度和pH值等条件。

02
检查和处理污染
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  1. 使用无抗生素培养液培养细胞,以观察是否有污染迹象。

  2. 如发现污染,应立即更换培养物,并对培养箱和培养器具进行彻底清洁和消毒。

  3. 对于支原体污染,需要进行专门的检测和处理。

03
优化操作过程
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  1. 严格控制胰酶消化时间,避免过长或过短导致的细胞损伤。

  2. 根据细胞特性和实验需求调整接种密度,确保细胞在适宜的生长环境中生长。

04
更换新的细胞株
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如果细胞老化严重或无法恢复生长,可能需要考虑更换新的细胞株。

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综上所述,传代后细胞不长可能由多种原因引起,需要综合考虑并采取相应的处理措施。通过仔细分析和调整培养条件、检查和处理污染以及优化操作过程等方法,可以有效地解决这一问题并促进细胞的正常生长。







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