上海富衡 | 开学第一步：复苏冻了一个假期的细胞

确保实验环境整洁，所需仪器设备如净化工作台、离心机、恒温水浴箱、培养箱等处于良好状态。

准备适量的新鲜培养基，置于37℃培养箱中预热。

从液氮罐或-80℃冰箱中迅速取出冻存管，注意佩戴防护手套和护目镜，以防冻伤和液氮溅射。

将冻存管直接放入预热至37℃的恒温水浴锅中，不时摇动以加速融化。注意不要让水浴锅的水接触到冻存管的管口，以防污染。

融化时间应控制在2分钟内，以减少细胞在解冻过程中受到的损伤。

解冻后，用75%酒精擦拭冻存管外部进行消毒，晾干后打开瓶盖。

将融化的细胞悬液用吸管或移液枪转移至含有适量培养基的离心管中。

根据细胞类型和离心机的要求，选择合适的离心速度和时间进行离心。一般情况下，低速离心5分钟即可。

离心后，弃去上清液中的DMSO等冷冻保护剂，加入新鲜培养基重悬细胞。

将重悬后的细胞接种至培养皿或培养瓶中，置于37℃、5% CO₂的培养箱中进行培养。

根据细胞类型和生长情况，适时更换新鲜培养基，去除死细胞和代谢废物。