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上海富衡 | 细胞“不接地气”了怎么办?——“细胞飘了”原因分析和处理方法。

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细胞漂浮原因总结


细胞在培养过程中出现漂浮现象,可能由以下几个原因导致:



01
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细胞贴壁不牢:细胞在培养板或培养瓶中未能有效贴壁,可能是由于细胞密度太低、培养板表面处理不当或细胞种类特性(如半悬浮细胞或悬浮细胞)导致的。

02
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培养基不适宜:使用的培养基可能不适合该种细胞的生长,或者培养基中的营养成分不足,无法满足细胞生长的需求。

03
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细胞传代时操作不当:细胞传代时操作过于剧烈,可能会破坏细胞与培养板之间的附着,导致细胞漂浮。

04
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细胞状态不良:细胞可能处于亚健康状态,如刚飘起来的细胞并不一定是死细胞,而是处于一种亚健康状态,可能因为环境变化、营养不足或其他因素导致。

05
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细胞污染:如果培养基中存在污染,可能会产生黑色的漂浮物或其他杂质,影响细胞生长。

06
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细胞凋亡:细胞在凋亡过程中可能会失去与培养板的附着,从而漂浮在培养基中。

07
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温度和pH值不适宜:细胞培养环境的温度和pH值对细胞生长至关重要,不适宜的温度和pH值可能导致细胞无法正常生长。

08
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血清质量:胎牛血清的质量对细胞生长有很大影响,如果血清质量不佳,可能无法提供细胞所需的生长因子和营养物质。



综上所述,细胞在培养过程中出现漂浮现象,可能是由多种原因引起的。以下是一些处理方法:




处理方法






01 检查培养条件
  • 确认培养箱内的温度和湿度是否适宜。

  • 检查CO2浓度是否正确,因为这对于维持培养基的pH值至关重要。


02 确定细胞培养特性,优化细胞贴壁
  • 如果细胞贴壁能力较弱,可以尝试使用多聚赖氨酸或胶原蛋白等物质预先处理培养皿,以增强细胞贴壁能力。

  • 考虑减少换液时的冲击力,避免对细胞造成机械损伤。


03 调整细胞密度
  • 如果细胞密度过高,及时进行传代,以避免过度拥挤导致的细胞脱落。

  • 调整细胞接种密度,避免初始密度过低或过高。


04 及时换液
  • 确保定期更换新鲜培养基,以提供足够的营养并去除代谢废物。

  • 如果换液后细胞漂浮,考虑使用无血清培养基或减少血清比例。


05 避免温度和震荡影响
  • 避免将细胞暴露在室温下过长时间,保持培养箱内稳定的温度。

  • 减少操作过程中的震荡,尤其是在换液和移动培养皿时。


06 检查是否有污染
  • 观察培养基中是否有黑色或其他颜色的漂浮物,这可能表明存在细菌或支原体污染。

  • 如有污染,需使用抗生素处理,严重时需更换所有培养用品并重新培养。


07 细胞状态评估
  • 如果细胞处于亚健康状态,可以尝试将漂浮的细胞收集起来,重新接种到新的培养皿中,给予适当的恢复条件。


08 记录和分析
  • 记录每次操作的时间、方法和所用材料,以便分析问题所在。

  • 如果问题持续存在,可以考虑咨询专业人士或实验室同事,寻求帮助。

  • 总之,针对细胞漂浮的处理方法需要综合考虑多种因素,并根据具体情况调整策略。




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