上海富衡 | 助力生物科学领域新工具：富衡THP-1与U937成破骨细胞诱导试剂盒的全新上市！

1. 配制前将成破骨诱导添加物 A 放置于室温（＞20℃）冰箱内完全融化。

2. 用 75%医用酒精擦拭消毒试剂盒中各瓶/管表面。

3. 取 50mL THP-1或U937完全培养基，然后将成破骨诱导添加物 A 全部加入 THP-1 或 U937 完全培养基中。

4. 轻轻颠倒摇晃配制好的成巨噬细胞诱导分化完全培养基，使其混合均匀。

特别建议：如短时间内无法使用完全部的培养基，建议按照上述配方比例分批配制。剩余成分可以分装为合适的规格，按各自保存条件储存，切勿反复冻融。

分化流程（以 12 孔板为例）

1. 当 THP-1 细胞融合度达到 80-90%时，收集细胞并计数；

2. 使用 37℃预热的成巨噬细胞诱导分化培养基重悬细胞，按照 5×105~1×106 cells/孔密度进行铺板，每孔加入 1mL 成巨噬细胞诱导分化培养基。

3. 将细胞置于 37℃，5% CO2的培养箱中进行培养 48h。

4. 48h 换液，换成 37℃预热的成破骨诱导分化培养基，每孔 1mL。

5. 成破骨诱导培养过程中，每隔 1 天，吸去孔板中的诱导液，加入预热好的新鲜的成破骨诱导分化完全培养基；

6. 诱导分化 4-10 天，可观察到成熟的多核破骨细胞。

7. 诱导完成后即可进行染色或者下一步实验。