上海富衡 | 间充质干细胞成脂、成骨诱导常见问题汇总答疑

诱导试剂对细胞有一定刺激作用，诱导过程中一定要关注细胞状态，如果发现细胞皱缩，要马上撤去诱导试剂，换上完全培养基培养，等细胞恢复后，再继续诱导。

其实这也是因为细胞飘起来了，主要是因为诱导过程中对细胞是有一些刺激作用的，某些敏感的细胞就更容易飘起来。而“卷边”的情况出现，可能是由于操作者在换液过程中，操作不够轻柔，加液时边缘细胞受到冲击力较大，导致“卷边”。如果加液时，对着中间的某个部位，就会导致这一部位的细胞受力较大，导致“鼓包”。

茜素红染色的原理是间充质干细胞向成骨细胞分化的过程中，在细胞表面沉积钙盐，形成钙结节，钙离子与茜素红螯合，被染成红色或者紫红色。

成骨诱导后染色不深，说明钙结节形成较少，可以延长诱导时间，提高诱导效果。

有些细胞在成骨诱导过程中，会继续增殖，甚至出现部分区域细胞堆叠的情况，显微镜下观察疑似“钙结节”，但其实是细胞聚集形成的，因此茜素红染色不深或者无法染色。

特别提示：

不同组织来源的间充质干细胞和不同状态的间充质干细胞诱导出现钙沉积的时间和数量差异巨大，据了解有些脐带间充质干细胞出现钙沉积的时间大约1个月，有些脐带间充质干细胞甚至不能诱导出钙结节，这与细胞种类和状态关系密切。