转染细胞后看不到光(即无法观察到荧光),可能由多种原因引起。针对这一问题,可以从以下几个方面进行排查和解决:1检查转染条件转染试剂与DNA比例:确保质粒DNA与转染试剂的用量比例适当。不同的细胞类型可能需要不同的比例,因此需要通过实验摸索出最佳比例。转染方法:检查是否选择了适合目标细胞的转染方法。常用的转染方法包括化学介导(如脂质体转染)、物理介导(如电穿孔)和生物介导(如病毒转染)。不同的...
在细胞培养过程中,可能会遇到这样一些细胞:细胞间隙或者培养液里,一直有一些“小黑点”的存在,这些小黑点没有自主运动,不会增殖,经过检测,也排除了支原体污染。这些小黑点是什么呢?业内人士一般认为,它们是细胞分泌物和碎片形成杂质,有一些细胞由于分泌物比较多,比其他细胞更容易形成这种非生物类的杂质,也会显得背景有点“脏”。那么对于这些分泌物较多的细胞,我们可以在采取什么措施改善这种情况呢?定期更换...
细胞转染后多久能检测到荧光信号,这个问题并没有一个固定的答案,因为它受到多种因素的影响,包括细胞类型、转染方法、质粒的启动子强度、荧光蛋白的表达效率以及实验条件等。以下是一些一般性的指导和建议:细胞类型和转染方法绿色荧光细胞 细胞类型 不同细胞系的生长速率、代谢活动和对转染试剂的敏感性各不相同。因此,同一转染条件下,不同细胞系表达荧光蛋白的时间可能会有所不同。 转染方法 常见的转染方法包括化...
首先,我们要判断出现小黑点的原因。一般来说,小黑点出现的原因有以下几种可能:外源微生物污染。细胞碎片或者分泌物。血清中的沉淀。那么,我们要如何区分这几种情况呢?我们可以根据以下几个方面进行分析。1、观察培养基状态,是否出现浑浊?正常状态的DMEM(左图)与污染的DMEM(右图)对比细菌污染会导致培养基浑浊,此外细菌污染会使培养基PH突然降低,短期内颜色变黄,表明有大量酸性物质产生。2、观察黑...
01形态学观察法显微镜观察活细胞:通常具有透亮的外观、完整的细胞膜,以及清晰可见的细胞核和细胞质内的细胞器。对于贴壁细胞,活细胞能够牢固地贴附在培养皿或培养瓶上。死细胞:则呈现暗淡无光、细胞膜可能碎裂的状态,且无法有效贴壁(对于贴壁细胞而言)。悬浮细胞死细胞则可能表现出膜碎裂、内容物外泄等现象。细胞生长形态不同类型的细胞具有特定的生长形态,如成纤维型细胞呈细长形状并附着在基质上生长,上皮型细...
细胞漂浮原因总结细胞在培养过程中出现漂浮现象,可能由以下几个原因导致:01Num细胞贴壁不牢:细胞在培养板或培养瓶中未能有效贴壁,可能是由于细胞密度太低、培养板表面处理不当或细胞种类特性(如半悬浮细胞或悬浮细胞)导致的。02Num培养基不适宜:使用的培养基可能不适合该种细胞的生长,或者培养基中的营养成分不足,无法满足细胞生长的需求。03Num细胞传代时操作不当:细胞传代时操作过于剧烈,可能会...
细胞聚团原因细胞在培养过程中聚团的现象,通常是由以下几种原因引起的:01 细胞密度当细胞密度较低时,细胞之间更容易相互靠近并形成聚团。这是因为细胞在低密度条件下,为了寻找附着点或进行细胞间通讯,会趋向于聚集在一起。02 培养基成分培养基中的血清成分、生长因子、细胞因子等成分的不当配比或质量不佳,可能导致细胞聚团。例如,血清品牌或比例的改变可能会影响细胞的行为。03 细胞种类某些细胞类型在培养...
PCR技术介绍实时荧光探针PCR技术,又称为qPCR,是一种结合了PCR扩增和荧光检测的分子生物学技术。它能够在PCR反应进行的同时,实时监测特定DNA序列的扩增情况。该技术主要依赖于荧光标记的探针,这些探针能够特异性地结合到目标DNA序列上。在PCR循环中,随着目标DNA的指数级扩增,荧光信号也相应增强。荧光信号的强度与扩增产物的量成正比,因此可以通过荧光信号的变化来实时监测PCR反应的进...
传代后细胞不长可能涉及多个方面的原因,这些原因复杂且相互关联。以下是对这一现象的原因分析和相应的处理方法,希望能够帮助我们的客户解决这一问题。原因分析01细胞适应性问题更换培养液或血清:当细胞从一个培养环境转移到另一个新的培养环境时,它们可能需要时间来适应新的培养基或血清的成分。这种适应期可能导致细胞生长暂时停滞。02培养条件不当温度、CO2浓度和pH值:细胞培养箱的温度、CO2浓度和pH值...
随着天气越来越热,细胞污染、状态变差等情况变得越来越多。如果不注意防止“高温”,细胞会在培养中出现各种各样的问题。高温天气对细胞的影响高温天气对细胞的影响是多方面的,具体可以从以下几个方面进行归纳:直接对细胞结构的破坏蛋白质变性:高温会破坏蛋白质的空间构型,使其失去原有的生物学特性。蛋白质是细胞结构和功能的重要组成部分,一旦变性,将严重影响细胞的正常生理功能。这种变性在持续高温下是不可逆的,...
ONE293T细胞(富衡细胞库,FH0823)293T细胞是HEK(Human Embryonic Kidney,人胚胎肾)细胞的变种,具体来说,它是由HEK293细胞经过进一步转染SV40(Simian Virus 40,猿猴病毒40)大型T抗原后得到的稳定转染细胞系。这种细胞系具有许多重要的实验特性,包括但不限于:高转染效率:293T细胞非常容易转染,使用磷酸钙、PEI(聚乙亚胺)或脂质...
细胞是目前人类能够驾驭的最小生物工厂,细胞培养则成为了生命科学研究领域不可或缺的一环。 今天,就跟着小富学姐,来了解一下“细胞培养过程中可能遇到的细胞污染及处理方法”吧!暑期工作部署01细菌污染· 特征1、培养基可能在4-6小时内呈现混浊。2、稍加震荡,便会有很多混浊物漂起。3、显微镜下呈黑色细沙状,或背景有大量黑点。· 处理方法1、轻度细菌污染:可用10X双抗清洗处理。2、重度细菌污染:建...
小富在售后时常常会收到老师同学反馈细胞养得好好的,生长状态不错、形态还非常好,但冻存过后再复苏后细胞就开始不贴壁了。这其中涉及的因素过多,这篇小富在这里先就整理一部分原因。原因总结01冻存液质量过次冻存细胞时使用于冻存的溶液质量过次。无论甘油还是DMSO ,质量都是非常重要,质量过次导致细胞在冻存过程中死亡。02冻存细胞长时间在常温下放入冻存液的细胞长时间暴露在常温下。DMSO作为实验室常用...
细胞来源果蝇S2细胞是生化和免疫组化等实验中最常用的果蝇细胞系。该细胞系于1972 年由 Imogene Schneider 从果蝇胚胎中分离得到 (Schneider, 1972),是一种血淋巴来源的细胞。S2细胞照片果蝇S2细胞可用来在果蝇表达系统 (DES) 中进行外源蛋白表达。该细胞系可在没有CO2的室温条件下生长,在 Schneider果蝇培养基中以单层半贴壁细胞或悬浮细胞的形式存...
SD大鼠原代脂肪间充质干细胞提取的主要步骤1.实验材料准备:选择2周龄左右或200克左右的大鼠。准备灭菌器械,如镊子、眼科直剪、眼科弯剪、 磁珠等。准备5mL注射器、0.22μm滤器、泡沫板、图钉用于固定大鼠。75%乙醇用于消毒。预冷的无菌PBS水、15mL和50mL无菌离心管、细胞筛、无菌培养瓶等。培养基:SD大鼠脂肪间质干细胞完全培养基(货号:FH-G011)。SD大鼠脂肪间质干细胞完全...
在生物医药的广袤天地中,细胞系如同繁星点点,其中293系列细胞以其卓越的性能和广泛的应用,成为科研工作者们的重要工具。今天,就让我们一起走进293系列细胞的世界,探索它的奥秘。01关于293系列细胞293系列细胞的起源293系列细胞,起源于一个具有特殊基因背景的人类胚胎肾细胞。这些细胞最初由荷兰科学家Frank Graham博士在20世纪70年代通过腺病毒DNA片段转化而得到,从而实现了细胞...
什么是人脐静脉血管内皮细胞?人脐静脉血管内皮细胞,也称为Human Umbilical Vein Endothelial Cells(简称HUVEC),是从新生儿的脐带静脉中分离出来的一种细胞类型。这些细胞在血管内皮细胞实验和研究中占有重要地位,尤其是在心血管疾病的研究中。01来源与特性来源:HUVEC来源于新生儿的脐带组织,容易获取,没有伦理争议,且便于提取足量细胞。特性:这些细胞具有干细...
01细胞来源与特性01细胞来源与类型LLC细胞最初是由美国肿瘤学家Dorothy H. Andersen于1951年从一只C57BL/6小鼠的肺部分离出来的。该小鼠是由美国生物学家Clarence Cook Little在20世纪30年代末期选育出来的,因此也被称为“Little小鼠”。目前已经建立了许多LLC细胞株,其中以LLC1和LLC2较为常见。LLC是一种源自小鼠Lewis的肺癌细胞...
让人讨厌的梅雨季哎呀,梅雨季又来啦!你准备好和湿哒哒的空气、闷热的气息来场“约会”了吗?不过,这“约会”可不是那么轻松哦!潮湿的环境就像是个细菌病毒的“温床”,一不小心就可能“中招”。梅雨季节对细胞培养的影响【真菌污染增加】梅雨季节湿度高,为真菌如烟曲霉、黑曲霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌等的生长提供了良好的环境。真菌污染不仅影响细胞生长,导致实验失败。还可能通过孢子迅速扩散,污染实验室环境...
LNCAP细胞,即人前列腺癌细胞,具有一系列独特的特性,这些特性对于其在生物医学研究和癌症治疗中的应用具有重要意义。以下是关于富衡细胞库中LNCAP细胞特性的详细介绍:01细胞来源LNCAP细胞最初是由Horoszewicz JS于1977年从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上淋巴结细针穿刺的活体组织中分离建立的。这些细胞来源于前列腺癌转移灶,对研究前列腺癌的生物学...
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